Sarung tangan merupakan alat pembatas fisik terpenting untuk mencegah penyebaran infeksi. Sarung tangan harus diganti setiap kontak dengan satu pasien ke pasien lainnya untuk mencegah kontaminasi silang. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mendapatkan gambaran kebiasaan perawat gigi dalam menggunakan dan mengganti sarung tangan di klinik gigi swasta di Wilayah Jakarta Selatan. Jenis penelitian yang digunakan adalah penelitian deskriptif. Sampel penelitian adalah klinik gigi swasta yang berjumlah 30 klinik gigi di Wilayah Jakarta Selatan dengan menggunakan random sampling. Pengumpulan data dilakukan dengan cara pengamatan pada setiap klinik gigi di Wilayah Jakarta Selatan. Alat yang digunakan untuk penelitian berupa lembar checklist untuk melihat kebiasaan perawat gigi dalam menggunakan dan mengganti sarung tangan setiap ganti pasien. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa 100% perawat gigi di setiap klinik gigi swasta di Wilayah Jakarta Selatan sudah mengetahui dan mengerti bahwa harus menggunakan sarung tangan sebelum melakukan perawatan dan mengganti sarung tangan setiap selesai melakukan perawatan. Dapat disimpulkan penggunaan alat perlindungan diri perawat gigi di klinik gigi swasta di Wilayah Jakarta Selatan sudah sangat baik. Disarankan kepada perawat gigi di klinik gigi swasta tetap bekerja dengan memperhatikan dan mengikuti SOP yang sudah ditetapkan untuk mencegah terjadinya penularan infeksi silang.